杆状病毒-昆虫细胞表达与纯化服务

杆状病毒表达系统(BEVS)属于真核表达系统，安全性高，由于有较大的基因组所以能够容纳较大的外源基因，得到的重组病毒易于筛选，并且具有完备的翻译后加工修饰系统和高效表达外源基因的能力。该系统由转移载体、杆状病毒载体和宿主细胞组成。该系统采用一个或多个杆状病毒的超强启动子，将外源目的基因插入到启动子后，获得重组病毒，这种重组病毒在昆虫细胞复制的同时，使外源基因得到高效表达。

服务优势

杆状病毒表达系统与其他表达系统相比，具有以下的优势：

安全性：杆状病毒具有严格的种属特异性，不感染脊椎动物和植物，相对于其他病毒载体，如痘病毒、腺病毒载体等，有较高的安全性。

易于扩增：杆状病毒可以大规模生产具有生物学活性的重组蛋白产品。

外源基因表达效率高：与其他真核细胞表达系统相比，杆状病毒系统可以从受感染的晚期细胞中高效地表达外源蛋白。

表达产物具有较高活性：杆状病毒将会在昆虫宿主细胞中大量扩增，而且产生的重组蛋白会进行类似哺乳动物细胞中的翻译后修饰，表达产物具有很强的生物活性。

服务项目	特点优势
重组供体质粒构建	利用交配辅助遗传整合克隆（MAGIC）系统，只需要简单的细菌混合，就可以快速构建重组杆状病毒载体，能够大大的节约时间、精力和花费；可提供详细表达纯化条件，实验数据以及高低度病毒毒株。
重组杆状病毒载体构建
表达条件优化
蛋白表达与纯化

服务类型

实验项目	实验流程	交付内容	时间
获得重组供体质粒	基因的获得	核酸电泳图片	2周
	PCR扩增产物酶切连接到本公司改造过的pFastBac载体转化E.coliDH10β
	获得测序正确的重组质粒
扩大化培养	构建重组杆状病毒载体重组杆状病毒质粒转染昆虫细胞获得高滴度的病毒贮液	含有重组杆状病毒载体的质粒电泳图片高滴度的病毒贮液	3-4周
优化表达	高滴度的病毒贮液再次感染昆虫细胞表达产物SDS-PAGE电泳及western blot检测	SDS-PAGE电泳图及western blot印迹	1.5周
蛋白表达及纯化	纯化产物SDS-PAGE及western blot	1L上清的纯化产	1-2周