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纳米抗体定制服务

Nanobodies(又称VHH抗体或单域抗体)是来源于驼科动物,主要是羊驼和骆驼的小型抗体片段。它们是这些动物中自然存在的一种抗体,比人体中常见的四肽链抗体要小得多。

这种单域抗体由来自驼科重链抗体的单个单体可变区域(VHH)组成。这种独特的结构使得Nanobodies在各种应用中具有高度的多功能性和优势:

小分子量

纳米抗体的小尺寸(约15 kDa)使其具有强大的组织透过性,可以直接穿透血脑屏障,有利于肿瘤的诊断和靶向治疗。

高稳定性

纳米抗体的高稳定性来自其内部的多个二硫键,可以承受高温、强酸和强碱等变性条件,在90℃处理后仍能再生并恢复生物活性。

低免疫原性

纳米抗体不含Fc片段,避免了由Fc片段引起的免疫反应,并且与人类VH基因的同源性高达67%~87%,因此在人类生物样本中具有良好的生物相容性。

大规模生产交货期短

纳米抗体是亲水性且单肽链,无需糖基化修饰,因此可以在原核表达系统中制备。同时,纳米抗体不易失去生物活性,因此易于储存。

CUSABIO拥有羊驼免疫文库(VHH文库)和羊驼天然文库,因此我们可以为客户提供从抗原生产到合格重组抗体的一站式解决方案。

羊驼免疫分子筛选

噬菌体技术平台流程

服务流程:

1
抗原制备
15-20工作日
保证交付
  • SDS-PAGE,纯度≥90%
  • ELISA检测原始数据
2
稳转细胞构建
40-60工作日
保证交付
  • 细胞株检测报告
3
动物免疫及效价测定
30-40工作日
保证交付
  • 血清ELISA检测抗体滴度原始数据
  • 血清FACS检测原始数据

* 免疫效价多重测定

4
噬菌体表面展示文库构建
15-20工作日
保证交付
  • 噬菌体文库测试报告

* 测序比对:确保文库序列多样性>95%

* 涂板滴定:库容总量>10^9 cfu

* 插入率:确保插入率不低于90%

5
噬菌体表面展示筛选、阳性单克隆纳米抗体鉴定及阳性单克隆测序
15-20工作日
保证交付
  • ELISA检测原始结果
  • FACS检测原始结果
  • 阳性克隆测序及序列分析文件
  • 10株unique VHH 抗体
单B技术平台流程

服务流程:

1
抗原制备
15-20工作日
保证交付
  • SDS-PAGE,纯度≥90%
  • ELISA检测原始数据
2
稳转细胞构建
40-60工作日
保证交付
  • 细胞株检测报告
3
动物免疫及效价测定和血清FACS检测
30-40工作日
保证交付
  • 血清ELISA检测抗体滴度原始数据
  • 血清FACS检测原始数据

* 免疫效价多重测定

4
单B细胞分选
3-5工作日
高通量测序
10-15工作日
AI辅助筛选
3-5工作日
5
抗体重组表达及验证
15-20工作日
保证交付
  • 分别含有抗体重链、轻链的商业表达载体
  • 每个阳性克隆1mg抗体
  • ELISA检测原始结果
  • FACS检测原始结果
  • 10株unique VHH抗体

羊驼天然库筛选(30工作日)

服务流程:

1
抗原制备
  • 客户可提供抗原或选择华美生物抗原制备服务;
  • 抗原要求:1mg、纯度>90%(SDS-PAGE检测)、浓度>0.5 mg/mL。
2
天然羊驼噬菌体库筛选
15-20工作日
保证交付
  • 筛选过程噬菌体滴度
  • ELISA检测原始数据
  • 阳性克隆测序及序列分析文件
  • 不少于10条阳性单克隆的DNA序列与氨基酸序列
3
重组抗体表达与纯化
10-20工作日
保证交付
  • 抗体表达质粒
  • 放大200ml纯化多少提供多少,每个抗体至少100μg
  • 纯度95%以上(SDS-PAGE检测)
4
重组抗体质控
3-5工作日
保证交付
  • 抗原ELISA和内源性样本的FACS

注意:

① 客户可提供抗原或选择华美生物抗原制备服务;

② 抗原要求:1mg、纯度 > 90%(SDS-PAGE检测)、浓度 >0.5 mg/mL。


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