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蛋白

科赛博(CusAb)蛋白表达平台建立了从原核到真核四大重组表达系统,并建立无细胞表达系统,拥有基于昆虫病毒外膜蛋白展示的蛋白表达技术、膜蛋白表达技术等一系列蛋白表达及纯化技术,有能力制备各种高难度蛋白。所提供的重组蛋白,涵盖细胞因子、通道蛋白、受体蛋白、酶、激素蛋白、疾病相关蛋白以及各种动植物及病原微生物蛋白等,其中包括活性蛋白327种。

代表产品:

细胞因子:IL1A、IL8、TNF、IFNG、EPO、GM-CSF、BMP2、EGF、GDNF、VEGFA、CCL1等;

酶:AMPX、SERPINB2、TIGAR、ME2、SERPINI1、TIMP2、PSPN、SOD1、VSPF等;

激素:GH1、Prl、LEP、PTH等;

激酶:PAK7、PAK4、CDK2等;

其他:AIMP1、MDK、SHH、DKK1、MIF、TFF1、SAA1等。

五大表达系统优劣势分析

优点 缺点 应用
大肠系统
  • 1.

    遗传背景清楚;

  • 2.

    成本低,培养条件简单;

  • 3.

    转化操作简单;

  • 4.

    蛋白表达周期短;

  • 5.

    高繁殖率和高表达水平;

  • 6.

    可以选择载体和融合标签多;

  • 7.

    可调控不同参数得到最适表达;

  • 8.

    标签可以放在N/C端,并且带有酶切位点,容易切割。

  • 1.

    不能有效的形成二硫键和错误的折叠导致很容易产生包涵体;

  • 2.

    蛋白表达产物缺少修饰(如糖基化、烷基化、磷酸化、特异性的蛋白水解加工等);

  • 3.

    包涵体复性的成功率和回收率不是很高。

蛋白结构,酶活,药物原理研发;
诊断用途 。
酵母系统
  • 1.

    低成本、表达水平高;

  • 2.

    无自产内毒素;

  • 3.

    有效的蛋白折叠和分泌表达;

  • 4.

    简单的培养条件和纯化操作;

  • 5.

    产物可翻译后修饰:糖基化、磷酸化、酰脂化具有功能的表达蛋白;

  • 6.

    可利用简单无机盐培养基高密度发酵,生物量大;

  • 7.

    性质较原核表达的蛋白质更加稳定,特别适合于表达真核生物基因和制备具有功能的表达蛋白;

  • 8.

    实验室和工业操作简单。

糖基化修饰和哺乳细胞仍然有差异。 蛋白结构,酶活,药物原理研发。
昆虫系统
  • 1.

    繁殖速度相对较快,表达量高;

  • 2.

    表达病毒类蛋白更具有优势;

  • 3.

    糖基化修饰更接近于哺乳动物细胞表达;

  • 4.

    去糖基化修饰相对容易有利于结构鉴定;

  • 5.

    基因容量大:由于杆状病毒基因组较大,所以可携带较大的基因片段;

  • 6.

    安全性高:杆状病毒具有严格的种属特异性,不感染脊椎动物和植物,有较高的安全性;

  • 7.

    外源基因表达效率高:与其他真核细胞表达系统相比,杆状病毒系统可以从受感染的晚期细胞中高效地表达外源蛋白;

  • 8.

    表达产物具有较高活性:杆状病毒将会在昆虫宿主细胞中大量扩增,而且产生的重组蛋白会进行类似哺乳动物细胞中的翻译后修饰,表达产物具有很强的生物活性;

  • 9.

    易于扩增:杆状病毒可以大规模生产具有生物学活性的重组蛋白产品。

  • 1.

    培养基成本贵;

  • 2.

    前肽蛋白分泌效率低;

  • 3.

    病毒感染导致细胞裂解潜在的会降解目的蛋白;

  • 4.

    糖基化修饰和哺乳细胞仍然有差异。

蛋白结构,酶活,药物原理研发。
哺乳系统
  • 1.

    无自产内毒素;

  • 2.

    有效的蛋白折叠和分泌表达;

  • 3.

    所有的翻译后修饰,提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能;

  • 4.

    表达产物在分子结构、理化性质和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子。

  • 1.

    培养基成本贵;

  • 2.

    生长要求高。

蛋白结构,酶活,药物原理研发;
诊断用途;
细胞基础研究。
大肠无细胞系统
  • 1.

    高得率:我们提供原始的以及带有优化系列标签的pET载体,使膜蛋白的产量达到mg级;

  • 2.

    蛋白合成表达条件可操控;

  • 3.

    目的蛋白融合有6*His有利于纯化。

  • 1.

    有限的翻译后修饰;

  • 2.

    放大成本贵。

蛋白结构,酶活,药物原理研发;
体外克隆表达;
同位素标记蛋白应用于NMR;
插入非天然氨基酸(人工改造的特殊氨基酸)。
天然蛋白 重组蛋白 活性蛋白