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不容错过的标签抗体!

浏览次数:104      日期:2018年11月22日 13:46

标签抗体(Tag Antibody)


      标签抗体,别名为抗原表位,又称抗原决定簇,是抗原分子中决定抗原特异性的特殊区域或基团,是与抗体特异性结合的结构或序列。随着生物技术的发展,科研人员可以通过DNA重组技术,构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白,进而通过特异性标签抗体对其鉴定与纯化,以达到研究的需求。

      随着生物技术的发展,研究人员常利用DNA重组技术构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白,进而通过特异性标签抗体对其鉴定与纯化,以达到研究的需求;同时利用重组杂合体中含有一个多肽融合单体(亲和标签)这一特性,其也被广泛用于辅助目标蛋白的纯化。总之标签抗体是开展基因蛋白表达、信号转导和基因功能研究的常用工具。

      标签抗体(Tag Antibody)可用于检测和纯化各种商品化表达载体上的标签序列,籍以分析检目的蛋白的表达含量及其功能。其原理是抗原—抗体反应,这些标签抗体可以高度特异地结合对应的标签融合蛋白。

      常用标签包括:Flag、Myc、HA、His、GST、MBP等。

      Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目标蛋白;其纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。

      Myc标签(序列为:EQKLISEEDL)已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到二乙烯砜活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。

      HA标签系统利用一个HA(influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA)短肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛运用。

      His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小,且较容易分离和纯化,是目前使用最广泛的一种。

      GST标签体系具有蛋白表达率高,表达产物纯化方便,利于GST抗体制备的特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。

      MBP(麦芽糖结合蛋白)标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的重组蛋白。


华美标签抗体特别推荐

货号:CSB-MA000041M0m
种属反应性:All
免疫原:EQKLISEEDL (Myc) synthetic peptide conjugate to KLH
应用范围:ELISA, WB, IF, IP
引用文献:The double-edged sword of endoplasmic reticulum stress in uremic sarcopenia through myogenesis perturbation , Jheng JR,et al. J Cachexia Sarcopenia Muscle,Jan 29(IF=12.511)


 
 
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