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Podocalyxin(PODXL)单克隆抗体

浏览次数:402      日期:2017年08月11日 09:57

一、PODXL的结构特征

PODXL属于CD34家族成员之一,是富含负电荷的唾液黏蛋白,属于I型跨膜糖蛋白,包括高度唾液酸化的胞外结构域和一个短小的胞质尾区,其中胞外结构域包含大量可与N-和O-结合的糖基化位点,尾区带有蛋白磷酸化结合位点。

图片来自:文献【The Role of Podocalyxin in Health and Disease】

PODXL’s structure. Podocalyxin has an extensively O-glycosylated (ver-tical lines) and sialylated (triangles) extracellular mucin domain (purple), several sites of N-glycosylation (red circles), and a cysteine-containing globular domain (green). This is followed by a juxtamembrane stalk (blue), a single-pass transmembrane domain (pink), and an intracellular domain (green) with putative phosphorylation sites and a C-terminal DTHL sequence for interaction with PDZ domains.

PODXL又称为PODXL样蛋白1,由肾小球内皮细胞和足细胞合成,在足细胞成熟过程中固定于肾小球足细胞顶膜。此外,也存在于肾小球内皮细胞和壁层上皮细胞、造血干细胞、血管内皮细胞、神经元细胞以及肿瘤细胞。

二、PODXL的主要功能

PODXL位于质膜上,遍及整个细胞体分布,不依赖裂孔隔膜的完整而能够保持稳定,PODXL已成为足细胞诊断中最稳定的标记物。PODXL主要表达在肾小球上皮细胞而不表达于其他的尿道上皮细胞,故用它来定量检测尿中足细胞的脱落,对评价肾小球疾病中足细胞的损伤具有临床意义。

三、PODXL单克隆抗体(CSB-MA134471A0m)的应用     

我们生产的PODXL单克隆抗体可应用于ELISA、WB、IHC、IF、IP、FC检测。

WB:

 

4D2G7细胞株生产的抗体(1:250)在天然样本Hela、293、A549中检测,出现目的条带(59 KD),且可以识别小鼠脑组织(1:1500)和大鼠脑、心、肾组织(1:500)中出现目的带。

IHC:

    

4D2G7在子宫内膜癌和肾里面表达强烈,呈明显阳性。在睾丸、胰腺癌、肺癌、胃癌中未检测到阳性信号。

IF:

4D2G7细胞株产生的抗体在Hela、PC3、A549、Ntera2中检测到阳性信号且定位于质膜。

IP:

 

IP实验中,4D2G7细胞株产生的抗单克隆体在293中检测到阳性信号。

FC:

4D2G7-Hela

PODXL单抗的流式分析发现,在Hela细胞中检测到强阳性信号,且发光强度为105是无关对照组细胞发光强度的100倍。其他公司生产的该单抗的流式检测结果[实验组细胞组发光强度/无关对照组细胞发光强度]主要集中在5-30倍。