跨膜蛋白

跨膜蛋白(TP),也称为整合膜蛋白,占膜蛋白总量的70%~80%。其主要特征是不溶于水,其氨基酸组成疏水性强,也有亲水性氨基酸,由疏水性氨基酸组成的部分,深入脂双层的疏水区,与脂肪酸链共价结合,它们可分布在脂双分子层中或跨越全膜。跨膜蛋白在基本生理过程中起着重要作用,包括分子运输、信号转导和能量利用等。一方面,它们可用于向细胞传递外部环境的信号。另一方面,它们充当接收器收集有关外部环境信号。

基因组序列中有将近30%的基因编码跨膜蛋白,其中50%是目前已知药物的靶标。但由于跨膜蛋白表达和纯化非常困难,市面上关于重组的跨膜蛋白种类并不是很多。华美生物致力于蛋白表达的研发,除了常见的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、毕赤酵母、哺乳动物细胞和杆状病毒-昆虫细胞五大表达系统,还拥有无细胞表达系统。无细胞表达系统极大的促进了华美生物对重组跨膜蛋白的开发与优化。

优势

● 多种膜蛋白表达策略

病毒样颗粒 (VLPs) 技术平台

VLPs(Virus Like Particles)是由多个病毒的一种或者多种衣壳蛋白自动组装形成的纳米级别的微小颗粒。VLPs颗粒不含病毒核酸,不能进行自主复制,安全性高,具有与病毒颗粒类似的整体结构。

去垢剂技术平台

去污剂是同时具有亲水极性基团和疏水非极性基团的双极性分子,能够使脂膜解体释放膜蛋白,并在溶液中为去膜状态下的膜蛋白提供疏水环境,维持膜蛋白的疏水跨膜结构。基于此,去垢剂常用于解决TPs表达中的蛋白质的天然构象问题。

Nanodisc技术平台

在含有去垢剂的缓冲中,大部分膜蛋白可以维持稳定性和活性。但少数对去垢剂敏感的膜蛋白是不适宜含有去垢剂的缓冲条件的,具体表现为无法纯化,稳定性不好和没有活性。针对这类膜蛋白,我们建议尝试nanodiscs技术。

华美生物旨在为广大科研工作者提供种类齐全的全长多次跨膜蛋白以满足不同科研工作者们对跨膜靶点蛋白不同应用场景的需求。为助力多次跨膜蛋白开发研究,华美生物前后搭建了三个技术平台,分别是病毒样颗粒 (VLPs) 技术平台、去垢剂技术平台和Nanodisc技术平台。自这些平台建立以来,我们目前已成功开发出200种蛋白质,产量为mg/ml,包含具有1-15个跨膜结构域的跨膜蛋白(TP)和有毒蛋白,这些蛋白在传统大肠杆菌表达系统中均难以表达。

基于这些优势,华美生物目前可以产生36,000+种跨膜蛋白,主要包括G蛋白偶联受体(GPCR)、水通道蛋白(AQP)、离子通道、ATP结合盒(ABC)和人白细胞抗原(HLA)等等。

● 近200种全长跨膜蛋白

CLDN18.2 (4次跨膜)

CD20 (4 次跨膜)

ACKR1 (7 次跨膜)

ADIPOR1(7次跨膜)

RHD(11次跨膜)

SLC7A11 (12次跨膜)

● 经SDS-PAGE验证蛋白纯度均在85%以上

The purity of HTR1B (CSB-CF010882HUb2) (7 times) is greater than 90% as determined by SDS-PAGE with 5% enrichment gel and 15% separation gel.

The purity of CLCN3 (CSB-CF005482HU(A4) (15 times) is greater than 85% as determined by SDS-PAGE with 5% enrichment gel and 15% separation gel.

● 经WB验证蛋白特异性

CLDN18.2 (CSB-MP005498HU(A5)) (4 times) is detected by Mouse anti-6*His monoclonal antibody. The three bands respectively correspond to monomer, Homodimer, Homotrimer.

CD20 (CSB-MP015007HU) (4 times) is detected by Mouse anti-6*His monoclonal antibody.

● 功能性ELISA验证高活性

Immobilized ABCD1 (CSB-CF001068HU) (5 times) at 5 μg/ml can bind human PEX19, the EC50 of human PEX19 is 22.96-33.00 μg/ml.

Immobilized ACKR1 (CSB-CF624105HU) (7 times) at 1 μg/ml can bind human CCL2, the EC50 of human CCL2 protein is 48.64-60.24 μg/ml.

● 经SEM验证蛋白正确组装

The VLP-like structures of CLDN18.2 (CSB-MP005498HU(A5)) (4 times) has been confirmed by TEM.

The VLP-like structures of CD20 (CSB-MP015007HU) (4 times) has been confirmed by TEM.

产品目录

这里是所有跨膜蛋白的目录。您可以找到对应的产品或在本网站的搜索框中进行搜索。

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产品名称 货号 规格
Recombinant Halobacterium salinarum Cobalamin import system permease protein BtuC(btuC) CSB-CF532244HTL(A4) 100μg/20μg
Recombinant Human Steroidogenic factor 1(NR5A1) CSB-CF623795HU 100μg/20μg
Recombinant Human Adiponectin receptor protein 1(ADIPOR1),partial CSB-CF001367HU2 100μg/20μg
Recombinant Human G protein-coupled receptor 20 variant CSB-CF3008HU 100μg/20μg
Recombinant Human Melanocyte-stimulating hormone receptor(MC1R) CSB-CF086369HU 100μg/50μg/10μg
Recombinant Mouse Steroidogenic factor 1(Nr5a1) CSB-CF016065MO 100μg/20μg
Recombinant Mouse Sialidase-4(Neu4) CSB-CF803970MO 100μg/20μg
Recombinant Escherichia coli Lactose permease(lacY),partial CSB-CF365806ENV1 100ug/20ug
Recombinant Rice Amino acid permease(AAP6) CSB-CF3147OCO 100ug/20ug
Recombinant Human Immunoglobulin superfamily member 1(IGSF1) CSB-CF854051HU(A4) 100ug/20ug
Recombinant Escherichia coli Colicin-E5(col),partial CSB-CF323819ENL1 100ug/20ug
Recombinant Human Small integral membrane protein 4(SMIM4) CSB-CF823889HU 100ug/20ug
Recombinant Human coronavirus NL63 Envelope small membrane protein(E) CSB-CF764822HIX 100ug/20ug
Recombinant Human E3 ubiquitin-protein ligase RNF5(RNF5) CSB-CF857879HU 100ug/20ug
Recombinant Human herpesvirus 6A Glycoprotein U22(U22) CSB-CF718168HJZ 100ug/20ug
Recombinant Human herpesvirus 6B Protein U22(U22) CSB-CF889529HKA 100ug/20ug
Recombinant Human herpesvirus 1 Envelope glycoprotein G(gG) CSB-CF361844HWY 100ug/20ug
Recombinant Human coronavirus NL63 Membrane protein(M) CSB-CF757672HIX 100ug/20ug
Recombinant Mouse Integral membrane protein 2A(Itm2a) CSB-CF011903MO 100ug/20ug
Recombinant Mycoplasma pneumoniae P30 adhesin(p30) CSB-CF301931MLW 100ug/20ug

相关资源

跨膜蛋白介导细胞与细胞外环境间的信号传导,并执行许多重要的细胞生物学功能。例如,它是各种信号分子、激素和其他底物的受体;它参与细胞膜内部和外部之间物质、能量和信号的交换;它构成了各种离子跨膜的通道,该通道将营养物质和一些无机电解质输入细胞,并将有毒或无用的代谢产物排放到细胞中。

由于无细胞表达系统的独特优势,它们在跨膜蛋白表达中起着重要作用。

在无细胞表达系统中,我们可以修饰跨膜蛋白。例如,可以将非天然氨基酸添加到蛋白质表达中,以实现在常规重组表达后难以解决的复杂修饰过程。

无细胞表达系统表达的跨膜蛋白类型和功能是多种多样的。目前热销的跨膜蛋白包含以下几种:

  • G蛋白偶联受体(GPCR):G蛋白偶联受体(GPCR)是一类膜蛋白受体的总称。它能与细胞外分子结合并激活内部信号转导途径,最终激活细胞反应。 GPCR介导涉及视觉控制、肾脏功能、肿瘤发生、免疫反应和炎症的信号。
  • 水通道蛋白(AQP):水通道蛋白是一种位于细胞膜上的蛋白(内膜蛋白),它可在细胞膜上形成“通道”,从而控制水流入和流出细胞的过程。

    目前,我们已经通过无细胞表达系统成功开发了一些具有活性的水通道蛋白。其中,洗涤剂在膜蛋白的提取,纯化和操作中起着重要作用。若要了解有关在水通道蛋白中使用洗涤剂的更多信息,本文可能会为您提供帮助:Detergent的性质及其在膜蛋白中的应用

  • 离子通道:离子通道是各种无机离子跨膜的被动传输途径,是活细胞进行代谢活动和物质交换的重要途径。离子通道对于实现细胞的各种功能具有重要意义。
  • ATP结合盒(ABC):ATP结合盒(ABC)蛋白可以结合和水解ATP,并利用能量驱动各种分子穿过质膜以及内质网(ER)、过氧化物酶体和线粒体内膜。它参与脂质膜上特定分子的运输以及所有生物体的抗性。
  • 人类白细胞抗原(HLA):HLA是一种位于人体细胞表面专门向T细胞呈递短肽的蛋白质或抗原,在人体的免疫防御中起关键作用。HLA的临床应用主要是器官移植中供体和受体匹配。

    由无细胞表达系统表达的跨膜蛋白产物可用于研究跨膜蛋白的功能。跨膜蛋白整合到囊泡中进行结构和功能研究是膜蛋白研究的热门话题。